TOYOBO Code No. TRL-201 7,500U
Thermo T7 RNA polymerase is a genetically modified T7 RNA polymerase exhibiting increased thermal stability. The optimum reaction temperature of this enzyme is around 50ºC. The half-life of the enzyme at 50ºC is approximately 85 min. |
T7 RNA Polymerase 基本上是由 T7 phage (一種噬菌體)中發現的一種 RNA 聚合酶
基於這種噬菌體的生長特性,研究學者發現它的 RNA 聚合酶有很強的轉錄活性,很適合用來放在質體中大量表現我們所想要的基因,乃至於最後作出蛋白來純化。
所以 T7 RNA Polymerase ,在 T7 phage 中,扮演著基本的 RNA 聚合酶的功能,負責轉錄出 T7 phage 的 RNA。而眾多的生技公司將它放置在表現載體中,利用它強而有力的活性,能大量作出目標的基因。
常見的表現載體有:pET 系列 (含有 T 7 RNA polymerase 的 promoter)
而使用到的寄主,染色體中必須要有 (DE3)才行,所以通常都會在 一些 E. coli 中扭入 DE3 的基因,這樣 E. coli 才能做出這個 RNA 聚合酶。另外還要加入 IPTG 來誘導 T7 RNA polymerase 的表現。
TOYOBO公司提供具有高活性的 T7 RNA polymerase (Code No. TRL-201)
而 wild type 的 T7 RNA聚合酶是約1.9分鐘。
TOYOBO提供的T7 RNA ploymerase的最適反應溫度為50℃左右,在50℃的半衰期為約85分鐘。
Fig.1 Comparison of the transcripts with wild-type T7 RNA polymerase. |
Fig.2 Comparison of the specific activity with wild-type T7 RNA polymerase. | Fig.3 Comparison of the half-life with wild-type T7 RNA polymerase. |
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