2013年7月27日 星期六

TOYOBO提供熱穩定性高的 T7 RNA polymerase


TOYOBOWelcome to Toyobo Life Science Department

TOYOBO Code No. TRL-201 7,500U

Thermo T7 RNA polymerase is a genetically modified T7 RNA polymerase exhibiting increased thermal stability. The optimum reaction temperature of this enzyme is around 50ºC. The half-life of the enzyme at 50ºC is approximately 85 min.

T7 RNA Polymerase 基本上是由 T7 phage (一種噬菌體)中發現的一種 RNA 聚合酶
基於這種噬菌體的生長特性,研究學者發現它的 RNA 聚合酶有很強的轉錄活性,很適合用來放在質體中大量表現我們所想要的基因,乃至於最後作出蛋白來純化。

所以 T7 RNA Polymerase ,在 T7 phage 中,扮演著基本的 RNA 聚合酶的功能,負責轉錄出 T7 phage 的 RNA。而眾多的生技公司將它放置在表現載體中,利用它強而有力的活性,能大量作出目標的基因。

常見的表現載體有:pET 系列 (含有 T 7 RNA polymerase 的 promoter)

而使用到的寄主,染色體中必須要有 (DE3)才行,所以通常都會在 一些 E. coli 中扭入 DE3 的基因,這樣 E. coli 才能做出這個 RNA 聚合酶。另外還要加入 IPTG 來誘導 T7 RNA polymerase 的表現。

TOYOBO公司提供具有高活性的 T7 RNA polymerase (Code No. TRL-201)
而 wild type 的 T7 RNA聚合酶是約1.9分鐘。
TOYOBO提供的T7 RNA ploymerase的最適反應溫度為50℃左右,在50℃的半衰期為約85分鐘。



Fig.1 Comparison of the transcripts
with wild-type T7 RNA polymerase.


Fig.2 Comparison of the specific activity
with wild-type T7 RNA polymerase.
Fig.3 Comparison of the half-life
with wild-type T7 RNA polymerase.


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